Emocolture

Qualsiasi paziente in ambiente ospedaliero che sviluppi febbre o segni di sepsi dovrebbe sottoporsi a colture del sangue. Poiché la sepsi è una delle principali cause di morte, l'identificazione rapida dell'infezione del flusso sanguigno è obbligatoria per eseguire una terapia antibiotica adeguata. Potrebbero essere necessari più set di colture del sangue e si dovrebbero considerare anche colture di altri siti - ad esempio, urina, pelle e gola.

Come prelevare emocolture

Precauzioni

• Le tecniche asettiche devono essere utilizzate affinché i batteri della pelle non contaminino le bottiglie di coltura.

• Idealmente la pelle dovrebbe essere lavata con sapone e risciacquata con acqua sterile. Questo dovrebbe essere seguito dall'applicazione di una soluzione a base di iodio, che dovrebbe poi essere lavata via dopo 30 secondi di asciugatura, con una soluzione alcolica al 70%. Praticamente, questo accade raramente; tuttavia, ogni sforzo per utilizzare una tecnica asettica deve essere fatto - ad esempio, Betadine® e/o spray alcolico e guanti.

• Le soluzioni alcoliche di clorexidina hanno dimostrato di ridurre i falsi positivi nelle emocolture rispetto alla povidone-iodio acquosa.¹

• I contaminanti più comuni includono Staphylococcus epidermidis, Corynebacterium spp., Propionibacterium spp. e Bacillus spp. (ma non Bacillus anthracis).

Procedura

• I flaconi standard per emocoltura consistono in due flaconi - uno contenente un terreno di coltura aerobico e l'altro anaerobico.

• Di solito almeno 10-15 mL dovrebbero essere iniettati nei flaconi per emocoltura (questo dipende dai tipi di flaconi utilizzati).

• Volumi più piccoli sono spesso prelevati da neonati e bambini. Allocare 1 mL di sangue da un neonato in due flaconi, aerobico e anaerobico, ha dimostrato di migliorare il rendimento della coltura rispetto a 1 mL in un singolo flacone aerobico.²

• I dispositivi a vuoto più recenti consentono la venipuntura diretta con trasferimento di sangue nelle colture di sangue.

• In alcuni ospedali, i flebotomisti spesso prelevano colture di sangue.

• I risultati della contaminazione possono essere inferiori se effettuati da clinici più esperti rispetto al personale junior.

• Colture multiple da siti multipli aumentano il rendimento:
  

  • Questo è particolarmente vero nell'endocardite infettiva.

  • Un esempio è prelevare sangue da una fossa antecubitale, 30 minuti dopo dall'altra fossa antecubitale e l'ultimo da un terzo sito 30 minuti dopo.

• Le emocolture possono essere prelevate anche da linee - ad esempio, linee di pressione venosa centrale, linee arteriose.

• Gli studi hanno dimostrato che quanto segue può ridurre i tassi di contaminazione:³

  • Adesione a un protocollo.

  • Campionamento tramite venipuntura periferica piuttosto che tramite un catetere intravascolare.

  • Uso di guanti sterili.

  • Pulizia dei tappi delle bottiglie per emocolture con antisettici.

  • Inoculare le bottiglie per emocoltura prima degli altri tubi di sangue.

  • Campioni prelevati da un team di flebotomia.

  • Monitoraggio dei tassi di contaminazione.

  • Fornire feedback individuali e riqualificazione per coloro che hanno contaminanti.

• Uno studio ha dimostrato che sviluppare un nuovo processo per la raccolta di emocolture, enfatizzando un'attenzione rigorosa alla tecnica sterile, con l'uso standardizzato di antisettico cutaneo a base di clorexidina, aghi sterili, guanti sterili, campi sterili e una lista di controllo procedurale, ha portato a una riduzione della contaminazione delle emocolture al di sotto del 3%.⁴

• La decolonizzazione universale con bagni di clorexidina ha dimostrato di portare a una significativa riduzione della contaminazione delle colture ematiche.⁵

• Uno studio ha dimostrato che l'uso di un nuovo test PCR automatizzato per il rilevamento di Streptococcus pneumoniae, il GenomEra™ S. pneumoniae, può portare a risultati disponibili entro 55 minuti, il che è ovviamente significativamente più veloce rispetto ai metodi di identificazione utilizzati di routine.⁶

Problemi con le emocolture

• La contaminazione delle emocolture è un problema comune e prevenibile, soprattutto nel reparto di emergenza.⁷

• Le colture ematiche false positive dovute alla contaminazione del campione con batteri della pelle sono un problema comune che può portare a un uso non necessario di antibiotici, test di laboratorio aggiuntivi e un aumento della durata del ricovero ospedaliero, portando quindi a costi ospedalieri aggiuntivi significativi.⁸

• I tassi di veri e falsi positivi per le emocolture variano, ma comunemente si trovano ciascuno nell'intervallo del 5-10%.

• L'uso di squadre di flebotomia si è dimostrato efficace per ridurre i tassi di contaminazione delle emocolture.⁹

• È stato dimostrato che cambiare il metodo di raccolta delle emocolture in un processo più sterile porta a riduzioni significative nella contaminazione delle emocolture.⁷

• Esistono diversi tipi di sistemi per colture di sangue, sia manuali che automatizzati.

• Altri flaconi per colture sono disponibili e il loro uso dipende dallo scenario clinico - ad esempio, flaconi per colture per tubercolosi o funghi.

• Vengono introdotte nuove tecnologie che possono portare all'identificazione rapida dei patogeni nelle colture di sangue positive.¹⁰¹¹

• Diverse piattaforme molecolari possono identificare i batteri associati alle infezioni del flusso sanguigno molto più rapidamente rispetto ai metodi standard.¹²

• Una volta prelevate le colture di sangue, devono essere etichettate e inviate al laboratorio senza ritardo.

• In laboratorio le bottiglie vengono agitate e incubate a temperatura corporea. Se è fuori orario, le colture vengono solitamente incubate durante la notte.

• I set di colture di base vengono incubati per 14 giorni e la coltura cieca viene eseguita dopo 3, 7 e 14 giorni o non appena ci sono segni di crescita (ad esempio, torbidità, emolisi, colonie su pendenza di agar nelle bottiglie di Castaneda).

• Altre bottiglie possono essere incubate per 7 giorni o fino a 3 settimane se si sospetta un'endocardite batterica subacuta (SBE)/organismi fastidiosi.

• L'osservazione delle bottiglie, alla ricerca di un risultato positivo, viene effettuata almeno due volte al giorno quando si utilizzano sistemi manuali.

• I sistemi automatici sono disponibili e vengono utilizzati sempre di più. Un esempio è il sistema di coltura del sangue BacT/ALERT® dove una crescita positiva rilascia CO₂ che viene rilevato da un sensore che avvisa il personale del laboratorio (le bottiglie sono collocate in un armadietto speciale e collegate al paziente tramite un codice a barre).

• I nuovi flaconi BacT/ALERT® FAPlus e FNPlus BC contenenti perline polimeriche leganti antibiotici hanno dimostrato di migliorare la diagnosi di batteriemia.¹³

• Se viene rilevata una crescita, le bottiglie vengono subcoltivate e viene eseguita una colorazione di Gram. Da questo, vengono eseguite le sensibilità rilevanti. In alcuni casi, l'organismo può essere identificato entro poche ore dal rilevamento di un risultato positivo, utilizzando la colorazione di Gram e ulteriori test.

• Ulteriori test che possono essere eseguiti direttamente sulla coltura del sangue per accelerare l'identificazione includono la classificazione streptococcica, il test della coagulasi, i test antigenici per pneumococco e meningococco, ecc.

• Il microbiologo esaminerà quindi i risultati e informerà il personale coinvolto nella cura del paziente. Pertanto, i pazienti inizieranno una terapia provvisoria che verrà confermata una volta note le sensibilità.

• Di solito, se c'è una crescita, c'è generalmente solo un organismo; tuttavia, molto raramente, ci possono essere più di un organismo e il laboratorio eseguirà sensibilità e ulteriori test su tutti.